Live celleafbildning kræver mikroskoperDet minimerer fototoksicitet, opretholder celleviabilitet og giver billedbehandling i høj opløsning over tid. Almindelige valg inkluderer:
1. omvendte fluorescensmikroskoper:
Widefield Microscopes: udstyret med miljøkontrol (temperatur, CO₂, fugtighed) og følsomme kameraer (f.eks. SCMO'er). Ofte parret med fasekontrast eller DIC (differentiel interferenskontrast) til etiketfri billeddannelse.
Spinning Disk Konfokal: Reducerer fotoblegning med hurtigere scanning sammenlignet med traditionel laserskanningskonfokal. Ideel til dynamiske processer.
2. Letpladefluorescensmikroskopi (LSFM):
Lyser kun fokalplanet, hvilket drastisk reducerer lyseksponering og muliggør langvarig billeddannelse (f.eks. Timer til dage).
3. to-fotonmikroskopi:
Bruger næsten infrarødt lys til dybere vævspenetration og reduceret fototoksicitet, der er egnet til tykke prøver som 3D-kulturer.
4. TIRF (total intern reflektionsfluorescens):
Visualiserer begivenheder påCellemembran(f.eks. Handel med vesikel) ved at billette en tynd (~ 100 nm) optisk sektion.
5. Superopløsningsmikroskoper (f.eks. Sted, SIM):
Opnå højere opløsning, men kræver omhyggelig optimering for at afbalancere lyseksponering og cellesundhed.
6. Live-celleoptimerede systemer:
Inkorporere miljøkamre, adaptiv optik og detektorer med lavt lys (f.eks. EM-CCD-kameraer).
Nøglefunktioner til live billeddannelse:
- Miljøkontrol: opretholder temperatur, co₂ og fugtighed.
- Hurtig erhvervelse: Minimerer bevægelsessløring til dynamiske processer.
- Lav fototoksicitet: Filtre, LED -lyskilder eller lysarkbelysning reducerer skader.
Vælg baseret på opløsningsbehov, billeddannelsesvarighed og prøvefølsomhed.
